百健的達(dá)利珠單抗俗稱為Daclizumab?high-yield process，即高產(chǎn)工藝達(dá)利珠單抗，以區(qū)別于羅氏的藥物。Zinbryta與Zenapax一樣，都采用NS0細(xì)胞系，抗體亞型均為IgG1，也沒有進(jìn)行序列突變。那么百健是如何進(jìn)行蛋白工程改造的呢？概括來(lái)說(shuō)，Zinbryta通過(guò)工藝優(yōu)化得到了具備糖譜異質(zhì)性更低，無(wú)巖藻糖基化成分低等性質(zhì)的產(chǎn)品，從而使得ADCC活性降低（目的是減輕副作用），半衰期延長(zhǎng)約30%。下文將一一梳理其具體的工藝和質(zhì)量參數(shù)。

一、高效的制備工藝

羅氏達(dá)利珠單抗的制備工藝相對(duì)低效：如第一步capture使用了陰離子交換等（百健認(rèn)為Zepanax生產(chǎn)環(huán)節(jié)過(guò)多，純化收率會(huì)比較低，因此百健的產(chǎn)品稱為高產(chǎn)工藝達(dá)利珠單抗，即Daclizumab HYP）。百健進(jìn)行了制備工藝的系統(tǒng)性優(yōu)化。

二、質(zhì)量屬性：異質(zhì)性更低

產(chǎn)率關(guān)乎生產(chǎn)成本，但并非生物藥開發(fā)的最關(guān)鍵因素，質(zhì)量屬性才是決定成藥性和優(yōu)劣的根本。百健系統(tǒng)討論了兩者的質(zhì)量參數(shù)差異性，其中最重要的是N-糖基化異質(zhì)性、N-端和C-端異質(zhì)性

1. N-端、C-端異質(zhì)性

注：DAC代表Daclizumab，達(dá)利珠單抗。

從圖中看出，Zenapax的N-端谷氨酸焦谷氨酸化程度接近完全，而高產(chǎn)工藝達(dá)利珠單抗有一部分沒有發(fā)生焦谷氨酸化，從而以pE/Q形式存在。百健分析這與自己采用的信號(hào)肽有關(guān)，間接影響了焦谷氨酸化反應(yīng)的發(fā)生。

2. N-糖基化profile對(duì)比

Zenapax的N-糖基化profile異質(zhì)性更高：除G0、G1、G0-GlcNAc幾個(gè)主要糖型外，還包含部分G2、Man5、Man6、Man7、唾液酸化寡糖組分。而高產(chǎn)工藝達(dá)利珠單抗只包含G0、G1F、G0-GlcNAc幾種主要糖型，其他糖型含量很少。

在一組實(shí)例中，百健給出兩者量化數(shù)據(jù)。

3. ADCC活性和PK性質(zhì)的對(duì)比

糖基化的影響，尤其是無(wú)巖藻糖基化的影響，導(dǎo)致Zinbryta具有更低的ADCC活性和FcR介導(dǎo)的清除過(guò)程，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，Zinbryta的ADCC活性至少降低了30%，而半衰期至少增加了30%。

?4. 其他

由于兩者適應(yīng)癥不同，劑量也不相同，制劑處方也有很大改變，高產(chǎn)工藝達(dá)利珠單抗最大程度提高了制劑的穩(wěn)定性。

三、總結(jié)

老藥新用對(duì)于小分子藥物來(lái)說(shuō)，已經(jīng)見證過(guò)諸多華麗轉(zhuǎn)身的案例：如多發(fā)性硬化癥藥物富馬酸二甲酯等。隨著病理研究的深入，抗體藥物在許多非癌適應(yīng)癥藥物的拓展中取得了一系列進(jìn)展，尤其是炎癥性反應(yīng)在諸多適應(yīng)癥的深入研究。本文借Zinbryta獲批之際，梳理其蛋白工程的成果，為我們提供了一個(gè)抗體工程的經(jīng)典案例，今后，我們將見證更多蛋白工程學(xué)在抗體藥物中的應(yīng)用。

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